三、重复性试验
两份乳腺肿瘤患者血清,应用点免疫印迹发光法在同一NCM上重复测定20次,结果:病例1的TK1含量为194pmol/L,标准差为12;病例2血清的TK1含量为49pmol/L,标准差为21,两者的批内CV分别为0.062和0.043。
四、标本检测各组人群血清TK1的含量比较见表1;用点免疫印迹发光法检测血清的X线片结果。
五、乳腺肿瘤患者术后TK1的动态变化对1例乳腺良性肿瘤患者手术后0、26、37ｄ的血清进行检测,TK1分别为9.1、2.5、4.9pmol/L;而另1例淋巴结未转移的乳腺癌患者术后0、21、28、65、77、92ｄ的血清TK1分别为91.8、39.7、50.7、20.2、17.5、3.8pmol/L。结果表明,当患者完全康复时,TK1呈明显下降趋势。
检验医学新技术进展
免疫印迹法测定乳腺肿瘤患者胸苷激酶
湖北医科大学附属第一医院检验科李艳
1960年胸腺嘧啶核苷激酶(TK)被证实是胸腺嘧啶核苷(简称胸苷)合成DNA的关键酶,随后的研究表明[1],TK有两种同工酶,为细胞质TK(TK1)和线粒体TK(TK2),其中TK1与细胞分裂密切相关,在细胞分裂G1期含量比较低,到S期后逐渐升高,至G2期达到最高,因此,编码TK1的mRNA及其表达的蛋白质也就成为细胞增生的标志物。目前,实验室主要采用放射免疫法(RIA)检测血清TK的酶活性,由于125I标记脱氧尿嘧啶半衰期短,且具有放射性污染,难于在临床上推广。1996年He等[2]报道利用抗TK1多克隆抗体,建立westernblotting检测人TK1。在此基础上,我们利用抗TK1单克隆抗体,建立点免疫印迹发光法检测乳腺肿瘤患者血清中TK1,可用于乳腺肿瘤诊断、疗效观察、预后及肿瘤病理机制的研究,在鉴定良、恶性乳腺肿瘤取得了良好效果,现初步报告如下。
材料和方法
一、材料
